Статті

Сиротчук О.А., Кобець А.О., Тананайко О.Ю. Покращення характеристик методик ВЕРХ-УФ для визначення малих кількостей речовин у змивах при валідації відмивання

УДК 543.544.5.068.7;615.074
DOI: 10.15407/zht2024.22-24.057

Сиротчук О.А., Кобець А.О., Тананайко О.Ю.

Покращення характеристик методик ВЕРХ-УФ для визначення малих кількостей речовин у змивах при валідації відмивання.

У фармацевтичній промисловості очищення технологічного обладнання та лабораторного посуду відіграє ключову роль у забезпеченні якості та безпеки лікарських засобів. У цьому дослідженні ми вивчали можливості для зменшення межі кількісного визначення методом ВЕРХ-УФ для визначення малих кількостей речовин в змивах з технологічного обладнання. Для дослідження використано хроматограф Knauer Azura, обладнаний діодноматричним детектором Azura DAD 6.1 з оптоволоконною проточною коміркою довжиною 50мм. В якості нерухомої фази використано колонки Discovery HS F5 250×4,6 (5 мкм) і Discovery HS С18 250×4,6 (5 мкм). Показано, що використання водно-етанольних сумішей в поєднанні з пентафлуорофенільною нерухомою фазою (SiO2-PFP) дозволяє досягти кращого утримування модельної речовини – кофеїну порівняно з октадецилсилільною (SiO2-С18). Так при використанні SiO2-PFP і рухомої фази, що містила 40% етанолу у воді величина фактора утримування склала 0,7, а при використанні SiO2-С18 в тих самих умовах – 0,2. Також показано переваги використання етанолу в порівнянні з ацетонітрилом, адже при використанні в рухомій фазі 40 % ацетонітрилу отримано менший фактор утримування, рівний 0,4. Перевірено вплив збільшення об’єму інжекції на характеристики хроматографічного піку і показано, що за умови використання розчинника проби з меншою елюючою силою ніж рухома фаза, можна збільшувати об’єм інжекції до 250 мкл і за рахунок цього досягати нижчої межі кількісного визначення. За рахунок збільшення об’єму інжектування досягається низьке значення межі кількісного визначення, яке співрозмірне з межею кількісного визначення, які спостерігаються для методу ВЕРХ-МС. Так при інжетування в систему 250 мкл випробуваного розчину вдалося досягти межі кількісного визначення 0,27 нг/мл. Результати дослідження розширюють межі застосування методу ВЕРХ-УФ як потенційної альтернативи високозатратного методу ВЕРХ-MC для аналізування змивів при валідації відмивання технологічного обладнання або лабораторного посуду.
Ключові слова: високоефективна рідинна хроматографія , етанол, кофеїн, валідація очищення.

ЛІТЕРАТУРА

1. B. M. Nassani Cleaning Validation in the Pharmaceutical Industry, Inst. Valid. Technol. 2004. P. 38–58.
2. D. A. LeBlanc. Equipment cleaning. Encycl. Pharm. Sci. Technol. Third Ed./James Swarbrick. New York, 2007. P. 1580–1592.
3. P. V. Waghmare, A. S. Chinchole, B. N. Poul, and O. G. Bhusnure A Brief Review On Cleaning Validation And Its Significance In Pharmaceutical Industry, Pharma Sci. Monit. 2013. vol. 4, no. 4, P. 165–192.
4. B. M. Gupta Mamta Cleaning validation of pharmaceutical dosage forms, World J. Pharm. Res 2015. vol. 13, no. 9, p. 15.
5. P. P. Goti Development And Validation of Analytical Method for estimation of Diclofenac Sodium in Swab Samples., Int. J. Pharm. Sci. Res. 2013. vol. 4. no. 2, P. 741–744.
6. Ł. Czubak, A. Krygier, and B. T. Małecka Gas Chromatography Method of Cleaning Validation Process for 2- Propanol Residue Determination in Pharmaceutical Manufacturing Equipment, 2014. vol. 6, no. 3, P. 243–245.
7. Z. B. Todorović, M. L. Lazić, V. B. Veljković, and D. M. Milenović Validation of an HPLC-UV method for the determination of digoxin residues on the surface of manufacturing equipment, J. Serbian Chem. Soc. 2009. vol. 74, no. 10, P. 1143–1153. https://doi.org/10.2298/JSC0910143T.
8. L. Liu and B. W. Pack Cleaning verification assays for highly potent compounds by high performance liquid chromatography mass spectrometry: Strategy, validation, and long-term performance J. Pharm. Biomed. Anal.2006. vol. 43, no. 4, P. 1206–1212, 2007, doi: 10.1016/j.jpba.2006.10.008.